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硝酸甘油注射液的作用通常能够起到松弛血管平滑肌从而调整血管平滑肌的收缩状态，而且还能够改善心肌的供血，并且可以扩张外周血管降低外周血管阻力，起到降压的作用。
硝酸甘油注射液可以用于治疗冠心病，还能够起到预防心绞痛发作的作用，并且可以用于治疗高血压或者是充血性心力衰竭等疾病，也可以起到比较好的治疗效果。通常需要使用5%的葡萄糖或者氯化钠注射液稀释以后使用，采用静脉滴注的方法进行给药，在治疗期间也可以使用输液泵恒速输入，用药的时候需要有专业的医生来定好药物的剂量，才能够起到比较好的治疗效果。用药治疗期间部分患者可能会出现不良反应，如出现头痛眩晕等情况，这种情况下需要药物减药或者停药，部分患者可能会伴有恶心呕吐，或者出虚汗等现象的发生，使用剂量过量有可能会引发气短或者乏力，也可能会有心跳加快等现象的发生，所以在用药治疗期间要密切观察病情的变化，如果有不适的情况发生，一定要及时的减药和停用。
硝酸酯的药物使用时间不能过长，容易发生巯基耗竭而引起耐药的发生。